اقام فرع الامراض وامراض الدواجن في كلية الطب البيطري دورة تدريبية حول استخدام الطرق السيرولوجية في تشخيص داء المقوسات في الاغنام وحاضر الدورة  م.م. حسين عمران .

وكان الهدف من الدورة تعريف الحضور باكثر الطرق السيرولوجية المستخدمة في التشخيص وطرق القيام بها حيث  لايعتمد التشخيص على وجود الأعراض والعلامات السريرية سواء بالحيوان او الإنسان فقط فغالبا ما يكون الخمج بالمقوسات بدون أعراض تذكر اوتتشابه الأعراض مع الكثير من الأمراض الشائعة ولذلك فلابد من الاعتماد على الكثير من الطرق مثل الأعراض التشريحية المرضية ووجود الطفيلي في المقاطع النسيجية وكذلك إجراء الاختبارات السيرولوجية وغير السيرولوجية في الحيوان والإنسان ومن اهم الطرق المستخدمة الاختبارات المصلية  Serological test

اختبار صبغة سابين –فيلدمان .  Sabin –Feldman dye test

وصف هذا الاختبار لأول مرة من قبل sabin &Feldman,1948 ويمتاز هذا الاختبار بسهولة العمل وقابليته للتطبيق تحت الشروط المختبرية ,يستخدم هذا الاختبار لتشخيص الداء بعد أسبوع إلى أسبوعين ويصل أعلى  مستوى للأجسام المضادة بعد 5-16 أسبوع  , الا انه من سلبيات هذا الاختبار كونه عالي التكاليف وخطورته على العاملين بسبب استعمال كائنات حية

اختبار التلازن الدموي غيرا لمباشر IndirectHaemoagglutination (IHAT)

وصفه واستعمله لأول مرة Jacop &lunde  عام 1957 حيث يستخدم فيه مستضد مقتول مرتبط بكريات الدم الحمراء للأغنام المعاملة                        بمركب Pyruvic aldehyde اذ تلتصق أجسام الضد بكريات الدم الحمراء المتحسسة , إذ يتم حضن مصل المريض المراد فحصه مع خلايا الدم المتحسسة فإذا كان المصل حاويا على أجسام الضد فان كريات الدم الحمراء سوف تتلازن ومما يؤخذ على هذا الاختبار انه قليل الحساسية والخصوصية للإصابة الحادة

اختبار تثبيت المتمم Complement fixation tset

يعد من الاختيارات المهمة والمستخدمة في أوربا في تشخيص المقوسات ,والمستضدات المستخدمة هي عبارة عن مستضدات سطح الخلية او المستضدات الذائبة ويكشف هذا الفحص عن أجسام الضد الميتة على المتمم والتي تبدأ بالظهور بعد 4 أسابيع من الإصابة ومن ثم تنخفض بعد عدة أشهر ,يتميز هذا الاختبار بخصوصيته ولكنه اقل حساسية من (DT) واختبار التلازن الدموي غير المباشر (IHAT) وفقدانه للحساسية

اختبار تلازن اللاتكس Latex agglutination   test(LAT)

الانجاز حيث تظهر النتائج بعد 3-5 دقائق ويعتب  الخاصة بطفيلي المقوسة الكوندية بسبب سهولته وحساسيته               للمضيف   وتحتوي أداة اختبار تلازن اللاتكس على مادة عالقة لجزيئات polystyrene  أحادية الشكل والقابلة للذوبان فضلا عن مستضدات طفيلي المقوسة الكوندية وان هذا العالق مركز ومنقى بدرجة عالية لأنه يستعمل في تحديد وجود أجسام الضد IgG  كدليل على الإصابة                 المزمنة وIgM  للإصابة الحادة وان المستضد المستعمل هو الطور سريع التكاثر Tachyzoite  للطفيلي الذي يغطي حبيبات اللاتكس LAT اذ يعطي شبكة معقدات الضد والمستضد Anibody Antigen complex وفضلا عن سهولة إجراءه وحساسيته وخصوصيته فانه يمتاز بكلفته المناسبة وقلة الوقت والجهد اللازمين لاجراءه

اختبار التلازن المباشرDirect agglutination test (DAT)

إن أول من وصف واستخدم هذا الاختبار هما Fulton and Turk    عام 1959 وهو اختبار سريع الانجاز وعديم الخطورة ويستخدم فيه المستضد المقتول بالفورمالين ويتم تشخيص الأجسام المضادة لسطح الطفيلي كما في اختبار الصبغة (DT) وهو من أكثر الاختبارات حساسية وخصوصية في اكتشاف الإصابة الكامنة بداء المقوسات

اختبار التلازن المحورMAT  ) Modified agglutination test :

يستعمل اختبار التلازن المحور والذي هو عبارة عن اختبار التلازن المباشر والذي تم تطويره وتحويره على يد Remington &Desmants  عام             1980 وعلى يد Dubey &Desmant   عام 1987 ويستعمل هذا الاختبار للكشف عن أجسام الضد IgG  لطفيلي المقوسة الكوندية باستعمال مستضدات الحساسية وذلك عن طريق تحطيم الأجسام المضادة IgM  في مصل المريض بواسطة استعمال محلول دارئ Buffer solution  مخفف ومركب ال2-Mercapto ethanol

7  اختبار ارتباط إنزيم الخميرة للادمصاص المناعي                 Enzyme Linked Immuno sorbent Assay(ELISA)

أول من استخدم هذا الاختبار (Van-Waeman and Schurs ,1971) في هولندا وقد وضع الباحثان Nato& Remington   التقنية العامة للكشف عن جسم الضد في دم الحبل السري بطريقة الاليزا  ELISA (الكناني,2004 ) , اذ تستعمل مستضدات طفيلي المقوسة الكوندية لغلاف الصفيحة الدقيقة وتؤخذ هذه المستضدات من الطور سريع التكاثر Tachyzoite  للطفيلي مضافا لها الاغشية البروتينية للكشف عن أجسام الضد النوعية للطفيلي IgG  وIgM اذ يرتفع تركيز جسم الضد IgM بعد فترة قصيرة من التحفيز وينخفض بسرعة أكثر من IgG بينما جسم الضد IgG  قد يستمر بالارتفاع لاكثر من شهرين ويبقى مرتفعا لعدة سنوات وبذلك فهو مهم في تشخيص الإصابة الحادة وتحديد توقيت الإصابة وتأكيد الإصابة الولادية (Yazar et al., 2006) ,وقد وجد  Abbas,(2002) ان هذا الاختبار يمتلك كفاءة 100 % وخصوصية 83.3 %.

اختبار التألق المناعي غير المباشر

Indirect  Fluoressnt Antibody Test (IFAT) :

أول من استخدم هذا الاختبار في تشخيص داء المقوسات هو Goldman عام 1957 حيث يستخدم المستضد المخضر من فئران محقونة سابقا بمقوسات كوندي او المحضر من الأوساط الزرعية والمعاملة في محلول الفورمالين وهومن الاختبارات ذات الحساسية العالية للكشف عن أجسام الضد النوعية لطفيلي المقوسة الكوندية والتي تظهر خلال الأسبوعين الأولين من الإصابة وتصل أعلى معدلاتها في 6-8 أسابيع اذ يمكن تشخيص كل من الإصابة الحادة بالكشف عن IgM والإصابة المزمنة بالكشف عن IgG  (العدلان ,2007)

 

لا تعليق

اترك تعليقاً

لن يتم نشر عنوان بريدك الإلكتروني. الحقول الإلزامية مشار إليها بـ *